Nhân giống hoa đồng tiền bằng phương pháp nuôi cấy invitro có thể khắc phục nhược điểm của 2 phương nhân giống bằng hạt và tách nhánh cho hệ số nhân giống. Nuôi cấy hoa đồng tiền không những tạo ra cây giống tốt mà còn sạch bệnh, chất lượng hoa cao và độ bền dài.
Chuẩn bị
– Cây giống: khỏe mạnh không sâu bệnh
– Chậu trồng, khay trồng
– Đất trồng
– Giá thể: trấu hun
– Dụng cụ khử trùng, Cồn, nước cất
– Bình thủy tinh nhỏ
– Dao sắc bén đã qua khử trùng
Quy trình nhân giống hoa đồng tiền bằng phương pháp nuôi cấy mô invitro
Bước 1: Chọn vật liệu nuôi cấy nhân giống hoa
Lựa chọn những cá thể tốt, sinh trưởng tốt từ quần thể đã được chọn. Vật liệu đưa vào nuôi cấy là chọn những cây mẹ khỏe mạnh, không nhiễm sâu bệnh. Cây đang trong giai đoạn sinh trưởng và phát triển tốt. Khi bắt đầu ra hoa lựa chọn nụ hoa với đường kính 0,5 – 0,7 cm.
– Trồng vào trong chậu với giá thể từ trấu hun để hạn chế tối đa tỷ lệ nhiễm bệnh. Sau khi trồng khoảng 2 – 3 tuần thì có thể tiến hành lấy mẫu để nuôi cấy.
– Đỉnh sinh trưởng của cây là phần dùng để thực hiện phương pháp nuôi cấy.
Bước 2: Khử trùng tạo mẫu sạch
– Từ các cá thể, khỏe mạnh, tiến hành tuốt lá, lấy các đỉnh sinh trưởng.
– Rửa sạch đỉnh sinh trưởng bằng xà phòng, sau đó rửa lại bằng nước cất. Đặt vào bình để khử trùng.
– Ngâm khoảng 1 phút trong cồn 70 độ. Rửa sạch bằng nước cất. Sau đó ngâm khoảng 5 phút bằng canxihypocholorid 15%. Sau đó rửa sạch bằng nước cất
Bước 3: Tái sinh cụm chồi:
– Trong Petri sử dụng giấy vô trùng để thấm khô mẫu.
– Tiến hành tách đỉnh sinh trưởng và chồi nách có đường kính khoảng 5mm bằng dao chuyên dùng. Tiếp sau đó là cấy vào bình tam giác có môi trường dinh dưỡng phù hợp.
– Môi trường dinh dưỡng được bổ sung thêm: saccharose 3%, chất kích thích ra chồi xytokynin BA 0,7mg/lít.
– Sau 3 tháng các đỉnh sinh trưởng phát triển thành các cụm chồi, có kích thước đa dạng.
Bước 4: Nhân nhanh cụm chồi:
– Các cụm chồi, phải tách ra thành các chồi riêng biệt để nhân nhanh.
– Tiến hành đưa các chồi mới tách ra bào bình có môi trường MS được bổ sung: sacchorose 3%, agar 9 g/lít, BA 0,5mg/lít, GA3 0,1mg/lít. pH= 5,8.
– Sau khoảng 2 tháng nếu phát triển tốt sẽ có 4 – 5 chồi/cụm.
– Các cụm chồi sẽ phát triển thành cây non 30 – 40mm, lá xanh non.
Sau khi cây đạt kích thước 30 – 40mm. Tiến hành nuôi cấy ở môi trường MS có bổ sung sacchorose 3%, agar 9 g/lít, BA 0,5mg/lít, GA3 0,3 mg/lít, pH 5,8. Để duy trì cây, khoảng 1 tháng cây đạt kích thước 40 – 60mm là đạt yêu cầu.
Bước 6: Tạo cây hoàn chỉnh
Muốn đưa cây ra ngoài vườn ươm. Thì cây con phải đảm bảo sinh trưởng và phát triển đầy đủ rễ.
– Sau khi cây 40 – 60mm thì tiến hành chuyển vào môi trường tạo rễ MS có bổ sung: Saccharose 3%, agar 9 g/lít, NAA 0,3mg/lít, than hoạt tính 2g/lít, ở độ pH 5,8.
– Sau khoảng 2 tháng cây con sẽ có kích thước 7 – 10cm, bộ rễ phát triển hoàn chỉnh, có thể tiến hành mang đi ươm.
Bước 7: Tiến hành ươm trồng
– Tách cây ra khỏi bình tam giác, rửa sạch môi trường bám ở rễ, để ráo nước.
– Trộn đất phù sa và trấu hun có tỷ lệ 1 : 1. Trong điều kiện vụ hè thì trộn với tỷ lệ 2 : 1, sau đó giải đều trên mặt luống dày 10 – 15 cm.
– Trồng cây trên nền đã được chuẩn bị sẵn, mật độ trồng 5×5 cm.
– Lưu ý:
Khi trồng cây vào khay không để cổ rễ cây non ngập quá sâu, giữ ẩm và thoáng khí khi chăm sóc cây con. Hạn chế bức xạ quá lớn, nên ươm trong giàn có mái che.
Chăm sóc sau khi nhân giống hoa đồng tiền
Che một lớp lưới đen cho cây trong điều kiện ra ngôi vào mùa xuân, thu và mùa đông. Còn trong điều kiện mùa hè, che giảm 50% cường độ ánh sáng trong hai tuần đầu. Đảm bảo cường độ ánh sáng 2500 – 3000 lux và nhiệt độ 20 – 35°c.
Trong 2 tuần đầu tiên tưới nước giữ ẩm cho cây. Khi cây bén rễ, hồi xanh (sau 2 tuần) phun Atonik với liều lượng 100 ml/100 ỉ nước, phun 7 ngày/lần. Tưới NPK cho cây với tỷ lệ 3 : 2 : 1，liều lượng 50 g/1001 nước, phun 7 ngày/lần.
Phun thuốc phòng trừ bệnh cho cây con bằng Ridomil liều lượng 200 g/100 l hoặc Daconil 250 g/100 l nước, định kỳ phun 7 ngày/lần
